> บล็อก > ข่าวอุตสาหกรรม

ทำไมการเพาะเลี้ยงเซลล์จึงแยกเซลล์เม็ดเลือดแดงก่อน?

2022-12-23

การแนะนำเบื้องต้น
Erythrocyte lysate เป็นหนึ่งในวิธีที่ง่ายและสะดวกที่สุดในการกำจัดเซลล์เม็ดเลือดแดง นั่นคือ การแยกเซลล์เม็ดเลือดแดงด้วย lysate ซึ่งไม่ทำลายเซลล์นิวเคลียสและสามารถกำจัดเซลล์เม็ดเลือดแดงได้อย่างเต็มที่ Lysate cleavage เป็นวิธีการกำจัดเซลล์เม็ดเลือดแดงที่ไม่รุนแรง ซึ่งส่วนใหญ่ใช้สำหรับการแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของเซลล์เนื้อเยื่อที่กระจายตัวโดยการย่อยของเอนไซม์ การแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของเซลล์เม็ดเลือดขาว และการกำจัดเซลล์เม็ดเลือดแดงในการทดลองโปรตีนของเนื้อเยื่อและนิวคลีอิก การสกัดด้วยกรด เซลล์เนื้อเยื่อที่ได้รับจาก lysate ของเซลล์เม็ดเลือดแดงไม่มีเซลล์เม็ดเลือดแดง และสามารถนำไปใช้เพิ่มเติมสำหรับการเพาะเลี้ยงเบื้องต้น การหลอมรวมเซลล์ โฟลว์ไซโตเมตรี การแยกและการสกัดกรดนิวคลีอิกและโปรตีน ฯลฯ

คำแนะนำสำหรับการใช้งาน
ตัวอย่างเซลล์เนื้อเยื่อ
1. เนื้อเยื่อสดถูกย่อยโดยตับอ่อน/เอนไซม์หรือคอลลาจีเนส และกระจายตัวไปยังสารแขวนลอยเซลล์เดียว และส่วนเกินถูกกำจัดโดยการหมุนเหวี่ยง

2. นำ ELS lysate ออกจากตู้เย็นที่อุณหภูมิ 4â เติม ELS lysate ลงในเซลล์ที่ตกตะกอนในอัตราส่วน 1:3-5 (เพิ่ม 3-5ml ของ lysate ต่อ 1ml ของเซลล์ที่ถูกบีบอัด) ค่อยๆ เป่าและผสม

3. ปั่นแยกที่ 800-1000rpm เป็นเวลา 5-8 นาที แล้วทิ้งของเหลวใสสีแดงด้านบน

4. รวบรวมส่วนที่ตกตะกอนและปั่นแยกด้วยสารละลาย Hank's หรือสารละลายที่ปราศจากซีรั่ม 2-3 ครั้ง

5 หากการแคร็กไม่สมบูรณ์/สมบูรณ์ สามารถทำซ้ำขั้นตอนที่ 2 และ 3

6. เซลล์ที่แขวนลอยใหม่สำหรับการทดลองครั้งต่อไป หากสกัด RNA ควรทำในสารละลายที่เตรียมจากขั้นตอนที่ 4 โดยใช้น้ำ DEPC

เซลล์เม็ดเลือดแดงมีวงจรชีวิตสั้นมาก เพียง 120 วัน แต่พวกมันสร้างเลือดได้เร็วมาก และในกรณีนี้ พวกมันมีความสามารถในการแบ่งเซลล์เป็นพิเศษ และเป็นเซลล์ที่แบ่งตัวได้เร็วที่สุดในบรรดาเซลล์ทั้งหมด ดังนั้นเซลล์นี้จึงมีค่ามาก จึงมีประโยชน์อย่างมากต่อการเพาะเลี้ยงเซลล์ มันง่ายมาก มันไม่มีออร์แกเนลล์ในนั้นเลย มีแต่เยื่อหุ้มเซลล์และโปรตีน

ก่อนหน้า:ชุด ELISA มีหน้าที่อะไรบ้าง?

ต่อไป:ข้อกำหนดของรีเอเจนต์และการแสดงพื้นฐานของความเข้มข้นของสารละลาย