> บล็อก > ข่าวอุตสาหกรรม

ชุด ELISA มีหน้าที่อะไรบ้าง?

2022-12-23

ชุด ELISA อ้างอิงจากเฟสของแข็งของแอนติเจนหรือแอนติบอดี และการติดฉลากเอนไซม์ของแอนติเจนหรือแอนติบอดี แอนติเจนหรือแอนติบอดีที่จับกับพื้นผิวของตัวพาที่เป็นของแข็งยังคงรักษาฤทธิ์ทางภูมิคุ้มกันของมันไว้ และแอนติเจนหรือแอนติบอดีที่ติดฉลากของเอนไซม์ยังคงรักษาทั้งฤทธิ์ทางภูมิคุ้มกันของมันและกิจกรรมของเอนไซม์ ในช่วงเวลาของการวิเคราะห์ ชิ้นงานทดสอบ (ซึ่งมีการวัดแอนติบอดีหรือแอนติเจน) ทำปฏิกิริยากับแอนติเจนหรือแอนติบอดีบนพื้นผิวของตัวพาที่เป็นของแข็ง สารเชิงซ้อนแอนติเจน-แอนติบอดีที่เกิดขึ้นบนตัวพาที่เป็นของแข็งจะถูกแยกออกจากสารอื่นในของเหลวโดยการล้าง

แอนติเจนหรือแอนติบอดีที่ติดฉลากของเอนไซม์ถูกเติม ซึ่งยังจับกับตัวพาที่เป็นของแข็งด้วยปฏิกิริยา ขณะนี้ปริมาณของเอนไซม์ในเฟสของแข็งเป็นสัดส่วนกับปริมาณของสารในตัวอย่าง หลังจากเพิ่มสารตั้งต้นของปฏิกิริยาของเอนไซม์แล้ว สารตั้งต้นจะถูกเร่งปฏิกิริยาโดยเอนไซม์เพื่อเป็นผลิตภัณฑ์ที่มีสี ปริมาณของผลิตภัณฑ์เกี่ยวข้องโดยตรงกับปริมาณของสารทดสอบในชิ้นงานทดสอบ ดังนั้นการวิเคราะห์เชิงคุณภาพหรือเชิงปริมาณจึงสามารถทำได้ตามความลึกของสี

ประสิทธิภาพการเร่งปฏิกิริยาสูงของเอนไซม์ช่วยขยายผลการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันทางอ้อม ทำให้การทดสอบมีความไวสูง สามารถใช้ ELISA เพื่อตรวจหาแอนติเจน แต่ยังสามารถใช้ตรวจหาแอนติบอดีได้อีกด้วย

หลักการพื้นฐานของชุด ELISA
ใช้ปฏิกิริยาเฉพาะของแอนติเจนและแอนติบอดีเพื่อเชื่อมต่อวัตถุกับเอนไซม์ จากนั้นจึงสร้างปฏิกิริยาสีระหว่างเอนไซม์และสารตั้งต้นเพื่อการหาปริมาณ เป้าหมายของการวัดสามารถเป็นแอนติบอดีหรือแอนติเจน

มีรีเอเจนต์สามตัวที่จำเป็นในวิธีการตรวจวัดนี้:
â แอนติเจนหรือแอนติบอดีเฟสของแข็ง (ตัวดูดซับภูมิคุ้มกัน)
â¡ เอ็นไซม์ติดฉลากแอนติเจนหรือแอนติบอดี (เครื่องหมาย)
â¢ สารตั้งต้นสำหรับการทำงานของเอนไซม์ (สารช่วยพัฒนาสี)

ในการวัด แอนติเจน (แอนติบอดี) จะถูกจับกับตัวพาที่เป็นของแข็งก่อน แต่ยังคงรักษากิจกรรมภูมิคุ้มกันไว้ จากนั้นจึงเติมคอนจูเกต (เครื่องหมาย) ของแอนติบอดี (แอนติเจน) และเอนไซม์ ซึ่งยังคงรักษากิจกรรมภูมิคุ้มกันและเอนไซม์เดิม กิจกรรม. เมื่อคอนจูเกตทำปฏิกิริยากับแอนติเจน (แอนติบอดี) บนตัวพาที่เป็นของแข็ง สารตั้งต้นที่สอดคล้องกันของเอนไซม์จะถูกเพิ่มเข้าไป นั่นคือการเร่งปฏิกิริยาไฮโดรไลซิสหรือปฏิกิริยารีดอกซ์และสี

เฉดสีที่ผลิตขึ้นนั้นเป็นสัดส่วนกับปริมาณของแอนติเจน (แอนติบอดี) ที่จะตรวจวัด ผลิตภัณฑ์ที่มีสีนี้สามารถสังเกตได้ด้วยตาเปล่า กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน นอกจากนี้ยังสามารถวัดได้ด้วยเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ (เครื่องมือติดฉลากเอนไซม์) วิธีการที่ง่าย สะดวก รวดเร็ว และเฉพาะเจาะจง

ก่อนหน้า:บทนำของแผ่น Elisa

ต่อไป:ทำไมการเพาะเลี้ยงเซลล์จึงแยกเซลล์เม็ดเลือดแดงก่อน?