การเลือกเครื่องเพาะเลี้ยงที่เหมาะสมถือเป็นสิ่งสำคัญเพื่อให้แน่ใจว่าเซลล์จะมีการเจริญเติบโตอย่างเหมาะสมและผลการทดลอง เมื่อเลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์ สิ่งสำคัญคือต้องพิจารณาปัจจัยต่างๆ เช่น ประเภทเซลล์ วัตถุประสงค์เฉพาะของการเพาะเลี้ยง ขนาดของวัฒนธรรม ประเภทของอาหารเลี้ยงเซลล์ วัสดุและขนาดของภาชนะ การรักษาพื้นผิว ฝาปิดเพื่อความเหมาะสม การแลกเปลี่ยนก๊าซ และความเข้ากันได้กับอุปกรณ์ในห้องปฏิบัติการของคุณ
ต่อไปนี้เป็นปัจจัยสำคัญที่ควรพิจารณาเมื่อเลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์ที่เหมาะสม
1. เลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์ตามประเภทเซลล์
เซลล์สานุศิษย์
เซลล์เหล่านี้ต้องการพื้นผิวเพื่อยึดติดและกระจายออก สำหรับเซลล์ที่เกาะติด คุณจะต้องมีภาชนะที่มีพื้นที่ผิวเพียงพอสำหรับการเกาะติดและการเติบโตของเซลล์
ตัวอย่าง ขวดเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ จานเพาะเชื้อ และจานหลายหลุม
เซลล์แขวนลอย
เซลล์เหล่านี้เติบโตลอยอยู่ในตัวกลาง ดังนั้นจึงไม่พิจารณาพื้นผิว
2. เลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์ตามขนาด (ความจุปริมาตร)
วัฒนธรรมขนาดเล็ก
สำหรับการทดลองขนาดเล็กหรือการคัดกรองที่มีปริมาณงานสูง ถังขนาดเล็กถือเป็นอุดมคติ
ตัวอย่างเพลตหลายหลุม (เพลตเพาะเลี้ยง 6, 24, 96 เซลล์)
จานเพาะเชื้อหรือขวด T25
วัฒนธรรมขนาดใหญ่
หากคุณต้องการขยายเซลล์ในปริมาณมาก ภาชนะหรือเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพที่ใหญ่ขึ้นจะดีกว่า
ตัวอย่างขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T75 และ T175, เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ หรือขวดปินเนอร์สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์แขวนลอย
3. เลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์ตามการรักษาพื้นผิว
พื้นผิวที่ผ่านการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ
ภาชนะได้รับการบำบัดล่วงหน้าเพื่อส่งเสริมการเกาะติดของเซลล์ ทำให้เหมาะสมกับประเภทเซลล์ที่เกาะติด โดยทั่วไปสิ่งเหล่านี้จะถูกเคลือบด้วยสารต่างๆ เช่น คอลลาเจน ไฟโบเนคติน หรือส่วนประกอบเมทริกซ์นอกเซลล์อื่นๆ
พื้นผิวที่ไม่ผ่านการบำบัด
เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการเพาะเลี้ยงสารแขวนลอยหรือเมื่อเซลล์ไม่จำเป็นต้องเกาะติดกับพื้นผิว มักใช้กับเซลล์ที่เติบโตอย่างอิสระในตัวกลาง
4. เลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์ตามวัสดุ
โพลีสไตรีนที่ใช้กันทั่วไปสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์มาตรฐาน มีความชัดเจน ช่วยให้ตรวจสอบด้วยสายตาได้ง่าย และทำงานได้ดีกับทั้งเซลล์เกาะติดและเซลล์แขวนลอย
โพลีคาร์บอเนตหรือโพลีโพรพีลีนใช้สำหรับการใช้งานกับเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพบางชนิดและสำหรับภาชนะที่ต้องการความยืดหยุ่นมากขึ้นหรือการปรับสภาพพื้นผิวเฉพาะ
แก้วที่ใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อมาตรฐานเนื่องจากต้นทุนและความสามารถในการแตกหัก ภาชนะแก้วอาจเหมาะสำหรับการใช้งานเฉพาะหรือการเพาะเลี้ยงในขนาดใหญ่
ขวด
สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ทั่วไป มักใช้ขวดที (T25, T75, T150) พื้นผิวเรียบเป็นพื้นที่ที่ดีสำหรับการเกาะติดของเซลล์และการเจริญเติบโต สามารถใช้ได้ทั้งสำหรับเซลล์สานุศิษย์และการเพาะเลี้ยงสารแขวนลอยหากรักษาสภาวะที่เหมาะสมไว้
จานเพาะเชื้อ
พบได้ทั่วไปสำหรับวัฒนธรรมขนาดเล็กและสำหรับการทดลองที่ต้องมีการสังเกต เช่น การตรวจวิเคราะห์การก่อตัวของโคโลนี
จานหลายหลุม
สิ่งเหล่านี้มีประโยชน์สำหรับการคัดกรองที่มีปริมาณงานสูงและการทดลองขนาดเล็ก จานที่มี 6, 12, 24, 48,
96หรือมีให้เลือก 384 หลุม และเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการตรวจวิเคราะห์โดยใช้เซลล์ การปลดปล่อยไซโตไคน์ การทดสอบยา และการใช้งานที่มีปริมาณงานสูงอื่นๆ
ขวดปินเนอร์
ใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์แขวนลอย โดยเฉพาะอย่างยิ่งในปริมาณที่มากขึ้น ซึ่งจำเป็นต้องมีการควบคุมการกวนเพื่อรักษาการเจริญเติบโตของเซลล์ และเพื่อหลีกเลี่ยงการรวมตัวกันเป็นก้อนของเซลล์
เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ
สำหรับการเพาะเลี้ยงสารแขวนลอยขนาดใหญ่ เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพช่วยให้สามารถควบคุมสภาพแวดล้อมที่ซับซ้อนมากขึ้น (เช่น pH อุณหภูมิ การให้ออกซิเจน) และใช้สำหรับการผลิตในปริมาณมาก เช่น ในการผลิตชีวเภสัชภัณฑ์
6. เลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์โดยพิจารณาจากความเป็นหมันและการระบายอากาศ
ความเป็นหมัน
ตรวจสอบให้แน่ใจว่าภาชนะนั้นปลอดเชื้อหรือผ่านการฆ่าเชื้อแล้วเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อน ภาชนะเพาะเลี้ยงเชิงพาณิชย์ส่วนใหญ่จะผ่านการฆ่าเชื้อล่วงหน้า แต่ควรตรวจสอบบรรจุภัณฑ์อยู่เสมอ
การระบายอากาศ
ภาชนะบางชนิด เช่น ขวด มาพร้อมกับฝาปิดหรือตัวกรองที่มีรูระบายอากาศเพื่อให้มีการแลกเปลี่ยนอากาศและป้องกันการปนเปื้อนไปพร้อมๆ กัน นี่เป็นสิ่งสำคัญในการเพาะเลี้ยงเซลล์ในสภาวะที่มีความหนาแน่นสูง
7. เลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์ตามความสะดวกในการใช้งาน
หม้อนึ่งฆ่าเชื้อกับแบบใช้แล้วทิ้ง
ภาชนะเพาะเลี้ยงบางชนิดสามารถนึ่งฆ่าเชื้อเพื่อนำกลับมาใช้ใหม่ได้ (เช่น ขวดแก้ว ขวดพลาสติกบางชนิด) ในขณะที่ภาชนะอื่นๆ เป็นแบบใช้ครั้งเดียวและแบบใช้แล้วทิ้ง (เช่น จานเพาะเชื้อพลาสติก จานหลายหลุม)
การจัดการและการขนส่ง
พิจารณาความง่ายในการถ่ายโอนเซลล์ระหว่างหลอดเลือด ตัวอย่างเช่น เพลตแบบหลายหลุมอาจต้องใช้เพลตแบบพิเศษเพื่อให้ง่ายต่อการใช้งานกับอุปกรณ์ เช่น ปิเปตเตอร์แบบอัตโนมัติ
8. เลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์ตามปริมาตรของอาหารเลี้ยงเซลล์
เลือกภาชนะที่สามารถรองรับอาหารเลี้ยงเชื้อในปริมาณที่ต้องการโดยไม่เปลืองทรัพยากร หากทำงานกับการเพาะเลี้ยงที่มีปริมาณมาก อาจจำเป็นต้องใช้ขวดหรือถังปฏิกรณ์ชีวภาพขนาดใหญ่ขึ้น ในขณะที่ปริมาณที่น้อยกว่าจะเหมาะสำหรับจานหรือจานเพาะเลี้ยงเซลล์
9. เลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์ตามการพิจารณาต้นทุน
ใช้แล้วทิ้งและนำกลับมาใช้ใหม่ได้
ภาชนะพลาสติกแบบใช้แล้วทิ้งมีความคุ้มค่าและลดความเสี่ยงในการปนเปื้อน แต่อาจมีราคาแพงสำหรับการดำเนินงานขนาดใหญ่ ภาชนะแก้วที่นำกลับมาใช้ใหม่ได้มีต้นทุนล่วงหน้าที่สูงกว่า แต่สามารถฆ่าเชื้อและนำกลับมาใช้ใหม่ได้หลายครั้ง ทำให้ประหยัดมากขึ้นสำหรับการใช้งานในระยะยาว
ประสิทธิภาพเชิงปริมาณ
ตรวจสอบให้แน่ใจว่าขนาดภาชนะเหมาะสมเพื่อหลีกเลี่ยงการสูญเสียวัสดุ โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อใช้ตัวกลางหรือรีเอเจนต์สำหรับการเจริญเติบโตที่มีราคาแพง
10. เลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์ตามความต้องการการใช้งานเฉพาะ
การถ่ายภาพ
หากคุณต้องการเห็นภาพเซลล์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ ให้เลือกภาชนะที่มีวัสดุใสและขนาดที่เหมาะสมสำหรับการตั้งค่าการถ่ายภาพของคุณ (เช่น เพลตแบบหลายหลุมสำหรับการคัดกรองที่มีเนื้อหาสูง หรือจานก้นแก้วสำหรับการถ่ายภาพเซลล์มีชีวิต)
ความปั่นป่วนที่ควบคุมได้
สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์แขวนลอย ให้ลองใช้ขวดปินเนอร์หรือเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพที่ควบคุมการกวนเพื่อให้เซลล์แขวนลอยอย่างเท่าเทียมกัน
บทสรุป
การเลือกภาชนะเพาะเลี้ยงเซลล์ที่เหมาะสมจำเป็นต้องสร้างความสมดุลให้กับปัจจัยหลายประการ รวมถึงประเภทของเซลล์ ขนาดการเพาะเลี้ยง ความเข้ากันได้ของวัสดุ และความต้องการในการทดลองที่เฉพาะเจาะจง เซลล์ที่อยู่ติดกันจะต้องมีพื้นผิวที่ส่งเสริมการยึดติด ในขณะที่เซลล์แขวนลอยจะได้ประโยชน์จากปริมาณที่มากขึ้นและความปั่นป่วน สำหรับงานขนาดเล็ก เพลตแบบหลายหลุมหรือทีฟลาสก์อาจเพียงพอ ในขณะที่การเพาะเลี้ยงขนาดใหญ่อาจต้องใช้ขวดปินเนอร์หรือเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ ตรวจสอบให้แน่ใจเสมอว่าภาชนะนั้นมีคุณสมบัติตรงตามข้อกำหนดด้านการปลอดเชื้อและการจัดการของคุณ และพิจารณาความคุ้มทุนตามการใช้งานของคุณ
เมื่อคำนึงถึงปัจจัยเหล่านี้ คุณสามารถเลือกภาชนะที่เหมาะสมที่สุดซึ่งมีเงื่อนไขที่เหมาะสมสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์และเป้าหมายการทดลองของคุณ